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《遼寧化工雜志》2015年第三期

1實驗部分

1.1樣品檢測方法

1.1.1土壤前處理方法取出培養(yǎng)土壤的離心管，向離心管中加入20mL乙腈，渦旋3min，然后加入3g氯化鈉，再渦旋1min，以6000r/min離心5min，取上清液10mL旋干，用1mL正己烷定容，過0.45μm濾膜，待測。

1.1.2土壤樣品的氣相色譜檢測條件儀器：安捷倫6890N；色譜柱：安捷倫J&WHP-5毛細管柱(30m×0.32mm×0.25μm)；程序升溫：柱溫80℃，保持1min，以20℃/min的升溫速率升至180℃，保持1min，再以10℃/min的升溫速率升溫至260℃，保持1min，最后以5℃/min的升溫速率升溫至280℃，不保持；S/SL進樣口：溫度210℃，不分流，進樣量：2.0μL；載氣：高純氮(99.999%)，流量2.0mL/min；檢測器溫度：300℃，尾吹氮氣：60mL/min。在此色譜條件下濃度為1.0μg/mL的克菌丹標樣的保留時間為11.62min(圖1)。

1.2試驗方法

1.2.1含水率對土壤中克菌丹降解的影響稱取5.00g供試土壤(貴州)于50mL離心管中，分別加入0.6mL、1.2mL、1.8mL無菌水將土壤的含水率調(diào)節(jié)為12%、24%、36%，加入200μg/mL的標準品100μL于土壤樣品中，然后將土壤樣品置于25℃恒溫避光培養(yǎng)，分別在2、4、6、24、48、72、120、168h取樣，按1.4中的方法處理土壤樣品并測定土壤中克菌丹的殘留量。每個處理做三次重復(fù)。

1.2.2微生物對土壤中克菌丹降解的影響本實驗主要通過高溫滅菌的方法去除土壤中的微生物，將1.3中處理過的土壤(貴州)于200℃高溫滅菌3h，然后稱量5.00g滅菌土壤于50mL離心管中，加入1.2mL無菌水將土壤含水率調(diào)為為24%，加入200μg/mL的標準品100μL于土壤樣品中，同樣將土壤樣品置于25℃恒溫避光培養(yǎng)，分別在2、4、6、24、48、72、120、168、240h取樣，按1.4中的方法處理土壤樣品并測定土壤中克菌丹的殘留量。每個處理做三次重復(fù)。

1.2.3有機質(zhì)對土壤中克菌丹降解的影響去除土壤中的有機質(zhì)：稱取1.3中處理的土壤(貴州)30g于400mL的燒杯中，加入少量蒸餾水潤濕樣品，放置片刻，然后加入30%的雙氧水溶液50mL，用玻璃棒攪動加速氧化以達到去除有機質(zhì)的目的。最后，將去除有機質(zhì)的土壤放于50℃烘箱烘干，重新過2mm篩，備用。稱量5.00g去除有機質(zhì)土壤于50mL離心管中，加入1.2mL無菌水將土壤含水率調(diào)為為24%，加入200μg/mL的標準品100μL于土壤樣品中，同樣將土壤樣品置于25℃恒溫避光培養(yǎng)，分別在2、4、6、24、48、72、120、168、240h取樣，按1.4中的方法處理土壤樣品并測定土壤中克菌丹的殘留量。每個處理做三次重復(fù)。

1.2.4不同pH對土壤中克菌丹降解的影響稱量5.00g土壤(貴州)于50mL離心管中，調(diào)節(jié)其pH分別為4.5、7.2、8.7，含水率為24%，加入200μg/mL的標準品100μL于土壤樣品中，同樣將土壤樣品置于25℃恒溫避光培養(yǎng)，分別在2、4、6、24、48、72、120、168、240h取樣，按1.4中的方法處理土壤樣品并測定土壤中克菌丹的殘留量。每個處理做三次重復(fù)。

1.2.5不同溫度對土壤中克菌丹降解的影響準確稱量5.00g土壤(貴州)于50mL離心管中，加入1.2mL無菌水將土壤含水率調(diào)為為24%，加入200μg/mL的標準品100μL于土壤樣品中，將土壤樣品置于15、25、35℃恒溫避光培養(yǎng)，分別在2、4、6、24、48、72、120、168、240h取樣，按1.4中方法測定土壤中克菌丹的殘留量。每個處理做三次重復(fù)。

2結(jié)果與討論

2.1方法靈敏度及添加回收在處理好的土壤空白樣品中分別添加0.01、0.1、5mg/kg三個水平的克菌丹標準溶液，每個添加水平樣品重復(fù)5次，并做日內(nèi)日間實驗(連續(xù)做3天)，按1.4的方法進行樣品前處理和GC測定，采用此檢測方法，克菌丹的添加回收率為81.49%~99.11%，相對標準偏差(RSD)為2.43%~3.75%。結(jié)果證明此方法的精密度和準確度均符合要求，結(jié)果見表1。

2.2含水率對土壤中克菌丹降解的影響按照1.5.1中的方案進行實驗，得出含水率分別為12%、24%、36%的土壤中克菌丹的降解曲線(圖2)。圖2的研究結(jié)果表明：在土壤含水率為12%時克菌丹降解最快，含水率24%次之，含水率36%時最慢。因此，土壤中的含水率越低，克菌丹的降解速率越快。克菌丹的降解隨土壤含水量的增加而變慢。

2.3微生物對土壤中克菌丹降解的影響按照1.5.2中的方案進行實驗，得出克菌丹在滅菌土壤和未滅菌土壤中的降解曲線(圖3)。圖3的研究結(jié)果表明：克菌丹在未滅菌的土壤中降解較快，土壤中的微生物對克菌丹在土壤中的降解有顯著的影響。

2.4土壤有機質(zhì)對克菌丹降解的影響按照1.5.3中的方案進行實驗，得出克菌丹在未去有機質(zhì)土壤和去有機質(zhì)土壤中的降解曲線(圖4)。圖4的研究結(jié)果表明：克菌丹在未去除有機質(zhì)的土壤中降解較快，土壤中有機質(zhì)含量會對土壤中的克菌丹降解有顯著的影響，有機質(zhì)含量越高，克菌丹在土壤中降解越快。

2.5不同pH對土壤中克菌丹降解的影響按照1.5.4中的方案進行實驗，得出克菌丹在不同pH土壤中的降解曲線(圖5)。圖5的研究結(jié)果表明：克菌丹在pH=8.7時降解最快，pH=4.5時降解最慢，酸性土壤中克菌丹降解比較慢，堿性土壤中克菌丹降解比較快。

2.6克菌丹在不同溫度土壤中的降解按照1.5.4中的方案進行實驗，得出克菌丹在不同溫度土壤中的降解曲線(圖6)。圖6的研究結(jié)果表明：克菌丹在35℃土壤中降解最快，在15℃土壤中降解最慢，土壤環(huán)境溫度越高，克菌丹降解越快。

3結(jié)論

建立了一種用乙腈提取，氣相色譜儀測定土壤中克菌丹含量的方法。樣品分析結(jié)果準確，相對標準偏差小于10%，平均回收率為81.49%~99.11%，是一種快速準確分析克菌丹的理想方法，此方法操作簡單、快速有效、準確性及精密度均滿足農(nóng)藥殘留檢測的要求[5-6]。通過實驗室模擬土壤降解實驗表明：土壤中有機質(zhì)含量越高，微生物越多，含水率越小，pH越大，溫度越高，克菌丹在土壤中的降解越快。

作者：陳紅雨楊再會盧平張鈺萍張侃侃胡德禹單位：貴州大學