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第1篇

【摘要】 藥品常規檢驗中微生物學檢查最為重要,只有進行方法學驗證才能保障檢查方法的檢驗結果的準確性和檢查方法的科學性。對目前藥品微生物檢查驗證試驗中現存的問題提出自己的質疑和建議,進一步完善微生物檢查驗證試驗的限度檢查標準,為建立有效的藥品質量保障體系,加強規范管理。以防止藥品安全監管失控現象。

【關鍵詞】藥品;微生物檢查驗證試驗;問題及建議

幾乎所有藥品在應用于臨床前都要進行安全性檢查,一般分為“微生物限度檢查”和“無菌檢查”,其中最重要的檢查方式就是微生物檢查驗證試驗。檢查項目包括:酵母菌數、細菌數、控制菌、霉菌數檢查。檢查非規定滅菌制劑及原料、輔料受微生物污染程度的方法為微生物限度檢查法。檢驗藥典要求無菌的藥品是否無菌的檢查方法稱之為無菌檢查法。檢查項目包括:厭氧菌、需氧菌以及真菌檢查。自1980年頒布《藥品衛生檢驗方法》以來方法基本成熟,1995年頒布的《中國藥典》又提升為國家標準。經過多年的實踐,最明顯的是標準中的可操作性不夠、不統一、不集中等問題。

一、目前的現狀分析

1、檢查驗證試驗來源:目前大部分企業還沒有進行此項工作,其中冷門產品、老產品更是沒有進行此項檢查,藥品檢驗所抽查時也找不到相應的檢驗方法。有的暢銷產品、新產品正在試驗中,但也無法提供此項檢驗的方法。有的企業已經完成檢驗但以技術保密為由而不愿意提供給藥品檢驗所,擔心如按此方法檢驗產品不合格給自己找麻煩。這樣使得食品藥品監督管理部門很難正常實施監督的權力。

2、檢查驗證方法的執行:“藥品生產企業必須對其生產的藥品進行質量檢驗,不符合國家藥品標準或者不按照省、自治區、直轄市人民政府藥品監督管理部門制定的中藥飲片炮制規范炮制的,不得出廠。”這是《藥品管理法》中的規定。未經微生物限度檢查合格不得銷售或者使用。但是實際上只要藥品微生物學檢查項目合格,也不論是否經過方法學檢驗都可以進入市場而且也不影響銷售。因此,為了確保藥品的使用安全性必須完善藥品質量保障體系,嚴把生產企業源頭,藥品監督檢驗機構必須進行監督抽查,加強規范管理。基層藥品監督檢驗所是執法機構,是執行法定質量標準的職權部門,而不是在抽驗過程中探索建立新方法。

3、檢查驗證方法的權威性:生產企業的實驗室和藥品監督檢驗所的檢驗肯定有一定的不同,而且98號文件中也指出“同一個企業生產的相同品種,因原料來源不同,工藝改變或不同實驗室等原因,也可能導致檢測結果的差異。”比如無菌檢驗法中需要用黑曲霉為對照,因為黑曲霉有很大的毒性,必須用專業的凈化工作臺或者實驗室,只有達到一定實驗條件才能滿足實驗的要求。微生物限度檢查容易受試驗條件的影響,其別是對藥品中微生物生長有抑制作用的成分尤為突出。“當供試品有抑菌活性時,應消除供試液的抑菌活性后,再依法檢查。”是微生物限度檢查法的規定。基層藥品監督檢驗所對所檢的藥品中每種藥品的抑菌或者抗菌程度都不清楚。生產企業大部分并不委托基層藥品監督檢驗所進行檢查驗證,而且基層藥品監督檢驗所出具的檢驗證明生產企業也不認可;生產企業給提供的檢驗方法,基層藥品監督檢驗所也不認可。當前,很大一部分藥品的微生物限度檢驗方法缺乏權威性。

4、建立檢查驗證方法困難:由于微生物培養周期長、微生物限制檢驗方法工作復雜,必須經過多次的試驗,這就使得部分抽查工作很難在規定的周期內完成。全國各地對不同企業生產的同名稱不同規格的藥品、不同名稱的藥品、同規格不同輔料、原料、生產工藝的藥品,全都建立或者審核微生物限度檢驗方法這一工作量是巨大的。對于一線的藥品監督檢驗機構日常工作量更是繁多,而且從時間、經費和人力上都無法正常進行科學研究。

二、藥品微生物限度檢驗的建議

1、藥品微生物限度檢驗的過渡時期方法:在統一檢驗方法未出臺前,各藥品生產企業必須按照行業方法或者自己制訂的內控方法對生產的藥品進行“微生物限度檢查”或者“無菌檢查”,對于未經驗證的,不予以出廠銷售或者使用。各級藥品監督檢驗機構對抽查的藥品在未統一之前仍可使用原方法進行檢驗。

2、盡快統一微生物限度檢驗方法:為保障檢驗結果的準確性和檢驗方法的科學性,各生產企業都要用“微生物限度檢驗”或者“無菌檢驗”的方法。98號文件指出“不同企業生產的相同品種,特別是中成藥,因原料來源、工藝、輔料的不同,藥品可能表現出不同的抑菌特性”,而且隨著藥品的成分或者原檢驗條件改變都可能影響檢驗結果,檢查方法應重新驗證統一。對于同一種藥品,可能存在多種微生物限度檢驗方法,各個方法之間在試驗相對誤差、檢驗方法科學性、檢驗系統的適應性、檢驗方法重視性、試劑、檢驗儀器設備的簡便易得性、經濟節約性等各方面都有差異。國家可以在征求生產企業和監督機構意見后,再依據現在的具體情況提出一個切實可行的方法。建立科學、可信、準確、可行的藥品微生物限度檢驗方法,并提交給藥品監督檢驗機構,按照品種、原料、輔料、劑型等分類報上,由國家指定的部門綜合考慮各個方面因素整理出合理的驗證方法并公布。

3、藥品微生物限度缺項檢驗:藥品監督工作中不能因為難以進行“微生物限度檢驗”或者“無菌檢驗”,而對規定檢驗的項目進行缺項檢驗。

4、藥品微生物限度檢驗增加經費:“微生物限度檢驗”或者“無菌檢驗”的方法比正常檢驗工作需要更多的人力、財力和時間,各地負責機構應追加相應的檢驗試驗經費。

參考文獻:

[1]馬緒榮,蘇德模.藥品微生物學檢驗手冊[M].北京:科學出版 社,2005(09)

[2]單亞.《中國藥典》微生物限度標準及有關規則的討論[J].安 徽醫藥,2006(03)

[3]田頌九,丁麗霞,田潔.國內外藥典中質量標準的發展趨勢簡述 [J].中國藥學雜志,2007(01)

第2篇

關鍵詞：食品衛生檢驗；綜合設計性試驗；形成性評價；評價體系；問卷調查；自主合作；滿意度

中圖分類號：R155.5 文獻標識碼：A 文章編號：1673-1573（2013）03-0098-04

設計性實驗是指給定實驗目的要求和實驗條件，由學生自行設計實驗方案并加以實現的實驗。實驗教學改革是教學改革的重要組成部分，綜合設計性實驗是優化和整合實驗教學內容的重要途徑，能增強學生綜合分析能力、動手能力、數據處理及查閱資料能力，培養學生的創新能力、團隊協作能力。近年來逐漸為管理層和基層教師接受。驗證性實驗指實驗者針對已知的實驗結果而進行的以驗證實驗結果、鞏固和加強有關知識內容、培養實驗操作能力為目的的重復性實驗。河北經貿大學綜合設計性試驗占到20%，生物科學與工程學院占到30%，形成了一套行之有效的做法：選擇課題、課題調研、制定方案、實驗操作、綜合分析討論和論文報告的撰寫。但這些綜合設計性試驗多停留在實踐層面，缺乏深層次的挖掘。形成性評價是在教學過程中通過教師觀察、座談、活動記錄、問卷調查、學生自評、學生互評等形式對學生的學習行為、學習能力、學習態度和合作精神等進行的持續性評價[1]。傳統的終結性評價方式，是學習階段末以考試成績來評定學生學習能力和教學質量。我們將綜合設計性試驗與理論課的考試改革相結合，將學、做、考相結合，對學習態度、表現等進行形成性評價[2]，綜合評定成績，來進行該課程評價體系改革。

一、課程簡介

食品衛生檢驗在生產、研究、流通、監督部門均有相應的技術。為確保食品安全，國家八年來連續三次修訂食品微生物檢驗標準，并在2010版中升級為強制性標準，同時食品衛生微生物學檢驗更名為食品安全國家標準食品微生物學檢驗，但課程名稱仍沿用食品衛生檢驗。該課程多屬于程序性知識，常規書面考試考不了這類如何做的問題，本課程理論課時為16學時，實驗課時為18學時，先行課程有微生物學，學生已掌握了微生物的基本操作技能。食品衛生檢驗為校精品課程[3]，第五學期開設。實驗課程部分有完備的實驗大綱、實驗指導書、實驗報告與實驗考核制度等，為該課程開展綜合設計性試驗奠定了基礎。實驗教學內容按照食品安全國家標準要求[4]，進行菌落總數、大腸菌群、糞大腸菌群、霉菌與酵母菌的檢測。

二、實施過程

在兩個班平行進行驗證型實驗與綜合設計性試驗，選擇何種試驗以班為單位投票決定。兩個班的理論試驗課均由同一個老師完成。驗證性實驗交試驗報告進行常規閉卷考試；綜合設計性試驗班撰寫試驗論文作為考試，課程結束進行問卷調查。

驗證型實驗內容為：菌落總數測定、大腸菌群MPN計數、糞大腸菌群MPN計數、霉菌與酵母計數；實驗材料統一為一種自制玉米漿。教師在黑板上列出包括流程、配方在內的可操作的具體實驗步驟。

綜合設計性試驗老師提出約20個可選項目清單，由指導教師根據教學要求提出實驗目的和實驗要求，并給出實驗室所能夠提供的實驗儀器設備、器皿、藥品、試劑等實驗條件，由學生運用已掌握的基本知識、基本原理和實驗技能，提出實驗的具體方案、擬定實驗步驟、選定儀器設備（或器具、藥品、試劑等）、完成操作、記錄實驗數據、繪制圖表、分析實驗結果等。學生2～3人一組，自由組合選題，自選題所占比例較大。比較典型的題目列于表1。

兩種教學模式均在周末進行，驗證型實驗在規定的時間完成，但綜合設計性試驗在兩周內的任何時間實驗室對學生開放，老師基本上全程在場。

從形式上看均有預試驗報告，但驗證型實驗班是在交實驗報告時一同上交，內容與老師黑板上的雷同，有的同學甚至把實驗結果也當預計結果寫了上去，同學間報告內容雷同，到課率低，不動手做的同學從報告上看不出來。

綜合設計性試驗班在理論課上講解預試驗報告內容及寫法。要求重點寫明試驗實施的具體內容、方法、技術路線。擬解決的關鍵問題和實現方法，項目實施進度和安排。在試驗進行前二周上交。老師重點檢查方案的正確性、可行性。在試驗進行前一周返回學生，個別同學重新選題再寫，少數同學修改后再交老師審閱。

綜合設計性試驗班到課率96%，驗證型實驗班到課率僅60%。試驗進行過程中，驗證型實驗班在課前對可能出現的問題做了詳細的講解，學生問題很少，綜合設計性試驗班老師事先不講解問題，學生不停的提出問題，老師引導學生查閱國標、或討論解決。

驗證型實驗班實驗報告裝訂上交保存，學生看不到老師的修改與評分。綜合設計性試驗班的論文由老師批改3～5次，論文裝訂作為課程成績保存。表2是兩種評價體系的實施情況。

綜合設計性試驗班建立形成性評價體系。論文占60%，平時評價占40%：包括基本操作、學習與試驗過程的態度、提問次數、預試驗報告與論文修改次數、用于完成試驗的時間等，以等級量表的形式完成。論文本身的評分基本參照河北經貿大學畢業論文評分標準進行，主要含論文選題、寫作能力、論文結果的意義與價值等幾個方面。重視學生的實驗設計思路，并對其在實驗過程中處理突發問題的情況，進行綜合評定。論文定稿后制作幻燈片給全班同學演示講解，老師和同學評分各占分值的50%。

三、實施體會

根據維果茨基最近發展區理論，應選擇既具挑戰性、困難又是可以克服的任務。強調所選題目難度適中。所以我們給予學生的任務要求也應適中，實驗結果能說明問題即可。學生是新手，既不會干，也不會想。對綜合設計性試驗實施過程的關鍵點需要重點解決，教師應為學生提供學習支架[5]。例如對于無菌操作，老師將多年的經驗總結成一句話：“別將有菌的碰無菌的”，同時對實驗技能做實際演練。

形成性評價不僅使教師了解學生學習過程與成長過程，而且也是學生了解自己的過程[6]。他們了解分數得來的過程，通過適當的歸因對自己得出來的結果產生信心與滿足，不會出現閉卷考試導致的焦慮。而驗證型實驗的評價結果學生僅了解到一個分數或者還有名次。驗證性實驗重復老師的實驗，題目非自己所選，單調且引不起注意，而綜合設計性試驗自己選題、定方案，能引起極大的興趣；加上將試驗結果寫成論文作為考試結果使學生具有成就感，這樣目標與成就的相關性喚起了學生學習的動機，通過將復雜的看來達不到的目標分解成漸次完成的小目標：理論學習、試驗、論文寫作，較好地實現了動機理論[7]的注意、相關、信心、滿足四要素。

長期的應試教育，學生習慣了不動腦子，要教會他們思考是一個艱巨的任務。我們在實驗前、中、后都著重注意啟發思維。這些問題的答案在驗證性實驗中都由老師直接教給同學，看似對師生都省力，其實卻剝奪了學生思考的機會。下面是試驗前、試驗中、試驗后幾個實際的做法。

1. 試驗前。利用所學的微生物學檢驗知識和技能對不同的食品樣品和檢驗項目選擇最佳的檢驗方法，試驗后判斷各種檢驗結果，最終作出食品衛生評價。如檢測大腸菌群的時候應該用MPN計數法還是平板計數法呢，檢測大腸菌群的兩種方法各適用于何種情況？學生查閱資料和課件然后才能回答：檢測大腸菌群的MPN計數法適用于檢測樣品衛生狀況較好的樣。平板計數法適用于檢測樣品衛生狀況較差的樣。那么如何判斷樣品衛生狀況呢？食品安全國家標準（GB4789-2010）明確規定了微生物剩余樣品或同批樣品不進行微生物項目的復檢，意味著不能做預實驗，如何預估判斷呢？教師提出可通過查閱國標對不同產品大腸菌群指標值規定來判斷。學生實踐中還發現了食品衛生標準和檢驗檢測方法標準的匹配性問題，如大腸菌群食品衛生標準單位是MPN值/100g（mL），而升級后的檢驗檢測方法標準MPN值/g（mL），帶著問題學習衛生部16號通告后，明白了標準的動態發展性特點。

2. 試驗中。稀釋菌落總數、大腸菌群時用生理鹽水與磷酸鹽緩沖液、稀釋霉菌酵母菌樣品的時候，應采用無菌水進行稀釋（因為有1～2種的霉菌遇到生理鹽水或磷酸鹽會死掉）。一個樣品同時檢測菌落總數、大腸菌群、霉菌酵母菌，可否共用同一稀釋樣品，查閱國標與文獻后有的學生自己得出結論：如果能共用的話，要做驗證試驗，證明以磷酸鹽緩沖液或生理鹽水做稀釋液也可以得出以蒸餾水做稀釋液在統計學范圍內許可的相同的結果才行。如何掌握稀釋倍數也是普遍遇到的問題，有的同學采用加寬稀釋倍數的方法，勢必增加工作量，老師根據經驗，引導學生得出結論：根據標準的數量來確定稀釋倍數即可，因為檢驗的目的在于有沒有超標而不在于具體的數量。如果沒有標準，可以根據以前的經驗（或查類似的文獻）來稀釋。

3. 試驗后。學生實驗經常在空白對照中出現菌落，有時甚至所有空白對照都有菌落出現，國標規定樣品不得復檢，在查閱網上論壇及參照教師自身工作經驗后判斷，有時也不一定結果就不可用，若空白的菌未影響稀釋倍數時，可用數據。但若225mL稀釋原液污染，則不可用，因每一次稀釋，都會導致污染。這樣使多數結果基本能夠采用。在綜合設計性試驗過程中學生能夠發現問題、進行多維思考，增強了思辨性思維能力。

對多數同學來說，這是首次寫論文，不知從何下手，動手做難，分析數據更難。學生數據處理能力明顯不足，如多數同學針對不同稀釋度得出的菌落數不會計算菌落總數，有的同學甚至自創計算方法，老師強調新國標是強制性標準，其計算方法需嚴格遵循。同學重新查閱國標和課件，教師給出實際應用菌落計算的例子，使學生真正掌握菌落總數計數操作與計算。

學生針對散亂的數據不知如何歸類匯總，教師提出要先將實驗的主要情況和數據用文字、表、圖等提煉表達出來，然后對實驗結果進行分析研究，得出結論，并對實驗印證了什么、發展了什么，存在什么問題等要加以分析討論。老師從理論與實際兩方面著手，一方面在課堂上講論文寫作，另一方面提供實例及通過具體修改，使學生從思路、流程、格式與內容掌握撰寫論文的方法與步驟，從而學生能力得到很大的提高。

四、效果分析

學生將食品衛生檢驗的理論知識應用于實際，在真實生活中有所發現，然后把這些發現變成自己的財富。選題時先給學生擬定實驗方向，學生結對自行選題、獨立自主地進行探究，由此產生控制、勝任和成就等需要。在其實施過程中，通過指導學生利用課余時間查閱文獻資料進行立題設計，再經過教師對實驗課題的科學合理性、可行性進行論證。綜合設計性實驗教學的重要目的就是培養學生的創新意識和能力，對于較好的自選題目應給予正確的引導和鼓勵，本研究自選題目占80%以上。由于選題貼近實際，學生做出來的數據有實用價值，如說明食堂的筷子是否衛生，小市場的食品可否食用，從而激發了學生的積極性和責任心，他們將所學專業知識應用于實際，經過認真操作實踐后，其基本技能得到很大提高。同時，由于是開放式，學生根據需要安排實驗時間，某些環節可反復進行，從而會有更深的理解，使其綜合素質得以進一步提高。

在完成綜合設計性實驗的教學過程中，教師承擔的是“顧問”的角色，既要有做顧問的資格與能力，又要有做好顧問的技巧。指導過程注意學生批判性思辨能力、創造性思維與決策能力的培養。教師的觀念與角色轉變、責任心與組織能力、到位的指導至關重要。在帶教綜合設計性實驗過程中，要把握好引導、指導的尺度，既要循循善誘，不直接把答案告訴學生，又要嚴格要求學生，做到真正以學生為主體，充分發揮學生的聰明才智。另外，從指導查閱文獻到論文式的實驗報告的批閱與評分，需要教師付出大量的時間與精力，保證綜合設計性實驗完成的質量，就要求教師有更加高尚的師德和嚴謹的教風。

驗證性實驗班閉卷考試能得出正態分布的成績，而綜合設計性試驗班的形成性評價模式成績呈等級資料形式。形成性評價分數由教師評價、學生互評的分數組合而成。

對綜合設計性試驗班問卷分析。95%的學生選擇綜合設計性試驗寫作論文的考試方式。他們認為自行設計有興趣，試驗挑戰有樂趣，對教師的指導表示滿意。學生反映試驗過程中大家群策群力，通力合作，培養了團隊精神，放開了手腳，開闊了思路，敢想敢干，做到了既動手又動腦。參加綜合設計性試驗的4人在河北省大學生創業挑戰杯大賽中獲得一等獎。綜合設計性試驗班的學生43.24%的考研率明顯高于驗證性實驗班的23.07%。

教學的目的是開闊學生的心智。食品衛生檢驗實施綜合設計性試驗，讓學生以研究者的姿態介入到實驗中，喚醒了學生的潛能，學、做、考相結合，學生參與的形成性評價為宏觀上融會貫通課程、專業和學科知識，展示自己的綜合能力提供了一個可操作的平臺。培養了學生的責任意識、安全意識、質量意識、標準意識、團隊意識和創新意識。

參考文獻：

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[3]瑪麗埃倫，韋默.以學習者為中心的教學――給教學實踐帶來的5項關鍵變化[M].洪崗，譯.杭州：浙江大學出版社，2006：83.

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第3篇

注重培養學生的綜合素質

目前的大學教育不僅注重學生理論知識的學習，更注重學生對理論知識的運用和綜合能力的培養，包括使學生形成良好的思考能力、實操能力和綜合分析能力[6]。對于食品衛生檢驗這一課程來說，要充分發揮學生的主觀能動性，培養學生的綜合素質，主要體現在大型探索性、案例型實驗等方面上，這類實驗能夠讓學生對所學知識進行融會貫通并達到綜合運用的目的。因此，在課程后半段，指導學生自己設計未知結果、非驗證性質的大型探索性食品衛生檢驗實驗。對實驗中遇到的非確定性的問題指導教師同學生一起探討，引導學生進行自主分析解決。在這一過程中，學生在此類實驗的設計與實踐上取得了長足的進步。另外，積極鼓勵學生參加到教師的科研工作以及各類大學生創新性競賽項目中來，學生在參加此類工作的過程中，能夠了解目前在這一領域較為先進的研究方法和實驗技術。雖然并非所有的學生畢業后均從事食品科學相關科研工作，但開展這一工作能夠培養學生最基本的科研素養與實踐精神。相關課程論文可以是老師指定題目，或由老師根據選題劃定范圍，也可以是學生自擬題目，由學生查閱相關文獻，寫出大綱形式的摘要，經由老師批閱后再撰寫。要求論文能夠體現自己的想法，并有深刻的分析討論。通過這些訓練，可以充分發揮學習該課程的主觀能動性，培養學生的動手能力和分析問題、解決問題的能力，培養學生的科研素養及試驗能力。

利用食品安全事件進行食品衛生檢驗案例教學

食品衛生檢驗是與日常飲食安全關系緊密的學科，結合教學內容選擇適當的食品安全實例進行講授，能夠提高學生對科學研究的興趣，培養學生科學思維能力。要善于利用我國目前影響較大的典型性食品安全事件對學生進行案例教學，激發學生濃厚的學習興趣和求知欲望，引導學生查閱相關資料，分組討論并舉行專題講座，加深學生對這一問題的認識，并嘗試提出相關解決辦法及檢驗措施。在對此類問題進行討論分析的過程中，要采用“頭腦風暴”的方式[7]，盡最大可能發散學生的思維，獲得新觀點。在這一過程中，要盡量保護學生探索思維發展的積極性，使學生掌握科學的思維方式，激發學生對科學研究的興趣，提高他們分析問題和解決問題的能力。4優化理論與實驗教學內容傳統的食品衛生檢驗教學內容大部分為驗證性實驗。在進行此類實驗的過程中，所有的實驗項目均遵循實驗教材上的具體步驟，只是機械地進行模仿操作，而不去思考具體的實驗步驟為什么要這樣做，不能將所學的理論知識融會貫通，在之后工作中遇到實際問題時不知如何解決，缺乏獨立分析、解決問題的能力。為了改變這一現狀，將實驗教學內容改為驗證性實驗與綜合性實驗兩部分。第一部分為指定內容部分，以驗證性實驗為主，這部分內容足學生必須掌握的基本操作技術；第二部分選做內容部分，為綜合性實驗，由指導老師提供多個題目供學生選擇，主要進行未知結果的非驗證性實驗。例如在綜合性實驗內容上，將菌落總數、大腸桿菌總數等實驗內容整合為基本衛生狀況調查綜合性實驗，把同學分為若干組，每組檢測不同的樣品，根據自己的生活習慣或者調查身邊的同學的不同生活飲食習慣進行試驗材料的選擇，用來增加學生進行實驗的主動性，如冷飲、奶茶、方便面等學生經常接觸的小食品。另外，采用專題實驗講座的形式將一些較前沿的論題和食品衛生檢驗檢測設備介紹給學生，使學生了解一些食品科學相關的尖端知識，激發進一步學習深造的熱情。