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超氧陰離子自由基能力比較范文

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超氧陰離子自由基能力比較

《輕工科技雜志》2015年第五期

1實驗方法

1.1樣品采集與處理四種水果均用蒸餾水反復沖洗干凈,取日常食用部位,搗碎,5000r/min離心15min,離心所得上清液即為所需樣品。

1.2抑制超氧陰離子自由基能力測定利用黃嘌呤-黃嘌呤氧化酶反應系統產生超氧陰離子自由基(O2-•),當加入電子傳遞物質及gress氏顯色劑后,反應溶液體系呈現紫紅色,在550nm下測定其吸光度。當被測樣本中含有O2-•抑制劑時,則比色時測定管吸光度低于對照管吸光度,而如果被測樣本中含有產生O2-•物質時,則比色時測定管的吸光度值高于對照管的吸光度值,這樣通過以維生素C做標準,可計算出被檢測物質對O2-•的影響力。本試驗以0.15mg/mL維生素C作為樣品對照,以蒸餾水做空白對照,具體操作過程按照試劑盒說明進行。定義:在反應系統中,每毫升樣品在37℃下反應40min所能抑制的超氧陰離子自由基相當于1mg的維生素C所能抑制的超氧陰離子自由基的變化值為一個活力單位。

2結果與分析

2.1抑制超氧陰離子自由基最佳取樣質量濃度確定不同水果的最佳取樣質量溶度不同,一般最佳取樣質量濃度在百分抑制率45%-55%之間。由圖1至圖4可分別計算出四種水果抑制超氧陰離子自由基的最佳取樣質量濃度為1000mg/mL、500mg/mL、300mg/mL、700mg/mL。

2.2四種水果對超氧陰離子自由基抑制率比較及活力比較由圖5可知,四種水果對超氧陰離子自由基的抑制能力與其質量濃度呈正比,但是,在同一質量濃度下,抑制超氧陰離子自由基能力的順序為檸檬>西柚>蘆柑>葡萄。通過圖6可以看出,四種水果中,檸檬抑制超氧陰離子自由基的能力最強,抑制能力為2642.86U/mL,而葡萄抑制超氧陰離子自由基的能力最弱,抑制能力為750U/mL,西柚和蘆柑的抑制能力分別為1592.86U/mL和1193.88U/mL。

2.3四種水果間協同抑制超氧陰離子自由基比較在最佳取樣質量濃度條件下,采用兩兩組合方式對四種水果抑制超氧陰離子自由基的協同作用進行比較。由圖7中可以看出,四種水果任意兩兩組合后,其抑制能力均比單一存在情況下高。對于葡萄,其抑制超氧陰離子能力的順序為葡萄-檸檬>葡萄-蘆柑>葡萄-西柚>葡萄,檸檬對葡萄的正協同作用最為明顯,且兩兩組合之間的協同增效作用顯著(P<0.05)。對于西柚,其抑制超氧陰離子能力的順序為西柚-檸檬>西柚-蘆柑>西柚-葡萄>西柚,檸檬對西柚的正協同作用最高,但兩兩組合之間的協同增效作用不顯著。對于檸檬,其抑制超氧陰離子能力的順序為檸檬-西柚>檸檬-蘆柑>檸檬-葡萄>檸檬,西柚對檸檬的正協同作用最為有效,且所有兩兩組合之間表現出顯著的協同增效作用(P<0.05)。對于蘆柑而言,其抑制超氧陰離子能力的順序為蘆柑-檸檬>蘆柑-葡萄>蘆柑-西柚>蘆柑,檸檬對蘆柑的正協同作用最為明顯,兩兩組合間的協同增效作用同樣顯著(P<0.05)。在所有兩兩組合中,檸檬-西柚的組合抑制超氧陰離子的效果最好。

3討論

實驗結果表明,四種水果對超氧陰離子自由基均具有抑制作用,其中檸檬的抑制能力最高,其次是西柚、蘆柑、葡萄。它們對O2-•的半抑制率IC50分別為1313mg/mL、596mg/mL、368mg/mL、698mg/mL。在抗氧化協同作用上,在最佳取樣質量濃度條件下,采用任意兩兩組合后,其抑制能力均表現出正協同作用,協同增效作用可能是兩種不同水果復合使用后,提高了抗氧化酶的活性,從而導致其抑制能力提高;也可能是產生藕聯氧化反應,使各自的抗氧化活性物質在體系中更合理的分布,從而起到正協同作用。抗氧化協同作用是一個復雜的體系,其機理有待于后續進一步的實驗研究。

4結論

(1)從實驗結果來看,四種水果中檸檬對超氧陰離子自由基抑制能力最強,檸檬-西柚組合抑制超氧陰離子自由基協同效果最好,建議消費者日常可多食用。(2)四種水果均表現出一定的抑制超氧陰離子自由基的能力,因此,作為功能性食品,研究其抗氧化作用,對開發天然的抗氧化產品具有重要的指導意義.

作者:謝志新 陳琳琳 單位:泉州醫學高等專科學校實驗中心

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