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實驗步驟

①配制固定離析液。把鹽酸的原液稀釋三倍(鹽酸和蒸餾水的體積比為1∶2)。取其等量的鹽酸和同體積的95%的酒精混合，配成鹽酸-酒精固定離析液。此液能迅速殺死細胞并保持細胞近生活狀態，又能溶解胞間層，使細胞間的果膠質分解，細胞壁軟化或部分分解，有利于細胞的分散和游離，有利于染色體分散，提高單個細胞的觀察效果。

②水培的洋蔥根尖沒有根毛，最前端是約1mm透明的根冠，根冠上方乳白色部分為分生區，用刀片將根尖3mm左右剪下，立即投入固定離析液中，固定解離10～20min，待根尖酥軟即可。

③用鑷子從固定離析液中取出根尖，投入盛有清水的培養皿中漂洗10～20min。漂洗的效果直接影響染色，若離析液未洗凈，染色時材料不易著色。

④用鑷子將漂洗好的根尖放在載玻片上，滴一滴石炭酸品紅染液，用刀片將根尖切碎，15min后，材料染成紅色。⑤將載玻片上的染液吸去，滴上一滴清水，蓋上蓋玻片，用指甲肚輕輕敲打，使根尖成薄霧狀，這樣可以使細胞均勻地分散開來，有利于觀察有絲分裂的不同時期。

⑥觀察。把制好的壓片置于顯微鏡下，在低倍鏡下觀察細胞分散狀況，再在高倍鏡下鏡檢分裂相的特征。顯微鏡下，細胞核和染色體呈鮮紅的玫瑰紅色，胞質為淡藍色或無色，染色效果好。

在分生區內，平均每個視野(10×40)中少則能見到3～4個分裂相，多則可見十幾個分裂相;在較好的標本上，1個視野中就能找全4個期的典型分裂相。如觀察到的染色體分裂相多、染色體清晰可見的壓片可照相，可將照片制作成永久片長期保存(如圖1)。 4討論與分析一定濃度的鹽酸可以使植物分生組織細胞間的果膠質分解，有利于細胞的分散和游離。如果離析時間較短，則細胞間果膠質不能或很少分解，細胞之間相互重疊或連接，觀察效果差;如果離析時間過長，則影響細胞的結構及細胞內大分子物質的原始形態，不能正確反映細胞的生活狀態。

實踐中發現，固定離析13～15min效果好。取根尖是以3mm為宜。取長了會把伸長區的細胞取上，視野中不好找到分裂相，影響實驗效果。漂洗要充分，一個培養皿中不要漂洗過多數量根尖，2～3個即可，漂洗不干凈影響染色。染色的時間要超過15min，以便充分染色。

石炭酸品紅染液的特點是只染細胞核和染色體，背景不上色。

通過以上的實驗設計，取得了前所未有的實驗效果。觀察植物細胞有絲分裂是《植物學》及《植物學生物學》中一個重要的基礎實驗。對本實驗的過程、關鍵步驟、原理以及技巧的掌握，有助于激發學生的實驗興趣，提高認識水平，為以后的實驗打下堅實的基礎。

作者：張秀玲單位：山東德州學院生物系