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《中國衛生檢驗雜志》2015年第二十四期

摘要:

目的探究影響痰標本涂陽培陰結果的因素。方法對1191份涂陽痰標本進行培養，從痰檢陽性級別、患者就診服藥情況、標本保存時間進行統計分析。結果1191份涂陽痰標本的涂陽培陰率為20．07%，鏡檢報告級別≤8條、1+、2+、3+、4+痰標本的涂陽培陰率分別為37．50%、26．06%、22．06%、14．81%、8．08%，鏡檢級別越低涂陽培陰率越高，4+痰標本涂陽培陰率與≤8條、1+、2+、3+相比，差異有統計學意義(P＜0．05)。痰標本保存時間≤3d、3d～7d、＞7d的涂陽培陰率分別為14．75%、39．93%、45．95%，≤3d與3d～7d及＞7d的痰標本的涂陽培陰率比較，差異有統計學意義(P＜0．05)。結論痰培養標本的選擇、患者就診治療史、標本保存時間都直接影響到痰培養結果。

關鍵詞:

結核病;痰標本;涂陽培陰;影響因素

結核病是由結核分枝桿菌引起的傳染性疾病，控制傳染源是預防肺結核病的重要途徑，傳染源主要是排菌的肺結核病患者，尤其是痰涂片和培養陽性者［1］。結核分枝桿菌痰檢查對于發現傳染源、確定診斷和化療方案、考核療效、評價防治效果具有重要意義［2］，是實施全面監督化療策略(DOTS)的重要要素之一，對結核病防控工作起著重要的作用。其中痰培養檢測具有靈敏度高的特點［3］，極大地增加患者發現率，分離菌株可進行后續的藥敏檢測、菌種鑒定和分子流行病學分析等。探討影響痰培養結果的因素，保證痰培養質量就顯得尤為重要［4］。本文主要從痰標本鏡檢報告陽性級別、患者就診治療史、標本保存時間方面進行比對分析，為提高結核病實驗室工作質量提供數據參考。

1資料與方法

1．1資料信息來源于結核病信息管理系統(專報網)、肺結核患者登記本、肺結核患者隨訪登記本、結核病實驗室痰檢登記本、結核病實驗室痰培養登記本等。標本來自全市9所耐藥監測哨點及淄博市第一醫院結核病實驗室2014年1月－12月收集的1191份涂陽痰標本，保存于4℃冰箱。萋－尼染色試劑(批號:BA415031)、酸性改良羅氏培養基由山東省結核病防治中心統一制備。

1．2方法

1．2．1痰涂片鏡檢方法實驗室采用萋－尼染色法，鏡檢結果參照《中國結核病防治規劃•痰涂片鏡檢標準化操作及質量保證手冊》進行。

1．2．2痰培養方法視痰標本性狀做標本前處理，加1倍～2倍體積的4%NaOH消化液于痰瓶中，擰緊螺旋蓋，渦旋振蕩器上振蕩，使痰液充分勻化，室溫放置15min。用無菌吸管取去污染處理后的標本0．1ml，均勻接種在酸性改良羅氏培養基斜面上，每份標本接種2支酸性羅氏培養基。接種后斜面向上，于37℃環境中平放，24h后檢查培養基有無污染，如無污染，擰緊瓶蓋，直立放置，37℃繼續培養。

1．2．3結果報告方法接種后第3d、第7d各觀察一次菌落生長情況。發現菌落生長者，經抗酸染色涂片鏡檢證實后，可報告快速生長分枝桿菌陽性。如未發現快速生長分枝桿菌菌落生長，此后每周觀察一次，記錄菌落生長及污染情況。陽性生長物經抗酸染色涂片鏡檢證實后，可報告分枝桿菌生長。培養滿8周后未見菌落生長者方可報告培養陰性。觀察發現非抗酸桿菌生長時報告污染。

1．3統計學處理將數據錄入MicrosoftOffice2003建立數據庫，采用SPSS17．0軟件進行統計學處理分析，組間比較采用χ2檢驗，以P＜0．05為差異具有統計學意義。

2結果

2．1痰標本選擇與涂陽培陰結果對1191份涂陽痰標本按照鏡檢陽性級別進行分類統計，發現≤8條、1+、2+、3+、4+的涂陽培陰率分別為37．50%、26．06%、22．06%、14．81%、8．08%，總涂陽培陰率為20．07%。鏡檢級別越低涂陽培陰率越高(表1)。同時選擇4+痰標本的涂陽培陰率作為基準，其他鏡檢級別痰標本的涂陽培陰率與其比對，≤8條、1+、2+、3+涂陽培陰率差異均有統計學意義(χ2值分別為28．073、26．027、17．502、4．757，P＜0．05)。

2．2患者就診治療史對涂陽培陰率的影響從結核病信息管理系統(專報網)、肺結核患者登記本、肺結核患者隨訪登記本等獲取初診患者與復治患者的信息，進行匯總分析顯示，1191份標本中初診患者與復治患者的涂陽培陰率分別為16．07%和30．53%，復治患者涂陽培陰率高于初診患者涂陽培陰率，差異具有統計學意義(χ2=35．094，P=0．000)。

2．3痰標本保存時間對涂陽培陰率的影響≤3d、3d～7d、＞7d的痰標本對應的涂陽培陰率分別為14．75%、39．93%、45．95%。3d～7d、＞7d的痰標本的涂陽培陰率高于≤3d的痰標本，差異有統計意義(P＜0．05)(表3)。

3討論

涂陽培陰率是考核痰標本培養質量的重要指標，影響痰標本培養結果的因素較多，通過對1191份標本進行分析發現，在選擇培養對象方面，應盡量選取鏡檢報告級別高的痰標本作為培養對象，越是陽性級別高的痰標本說明結核分枝桿菌檢出越多，也反映了痰標本留取質量符合要求，是合格的痰標本，在培養過程中會出現較高的陽性率，充分表明了痰標本的質量對于培養具有重要影響［5］。在實際工作中做好正確引導患者留取肺部咳出的合格痰標本;提高實驗室人員涂片與鏡檢能力，避免定性錯誤與誤差出現，準確的讀取鏡檢結果;按照3涂2培的要求，在選擇痰標本進行培養時必須考慮陽性級別高的納入培養對象，提高檢出率。

本研究發現復治患者標本的涂陽培陰率顯著高于初治患者，具有統計學意義，可能與患者服用抗結核藥物有關，復治患者經過一段時間的抗結核藥物治療后，藥效發揮作用殺死體內結核桿菌，患者病情有所好轉，排菌減少及菌株活力低所致，也反映出其治療效果較好［6］。而初診患者沒有服用抗結核藥物治療史，活菌比例較高，因此標本的涂陽培陰率顯著高于復治患者。痰標本留取后保存時間較長，使得標本中的活菌數目以及結核桿菌的活力下降，進而使痰培養的涂陽培陰率降低，該結果與Paramasivan等報道的結果類似。綜合考慮痰培養標本的選擇、患者就診治療史、標本保存時間都直接影響到痰培養結果。建議結核病實驗室在開展痰培養時應注重選擇合格痰標本，在留取痰標本后的3d內盡早培養，對鏡檢報告級別低及復治患者的痰標本需要改進培養方法，確保培養質量。

參考文獻

［1］張敦熔．現代結核病學［M］．北京:人民軍醫出版社，2000:699－710．

［2］中華人民共和國衛生部疾病預防控制局，中華人民共和國衛生部醫政司，中國疾控預防控制中心．中國結核病防治規劃實施工作指南［M］．北京:中國協和醫科大學，2009:12－13．

［3］劉劍君，姜世聞，成詩明．中國結核病控制現狀分析及對策［J］．中國防癆雜志，2003，25(3):129－131．

［4］高風華，馮謙謹，江麗鳳，等．中國大陸2002－2010年法定傳染病疫情分析［J］．現代預防醫學，2013，4(4):756－759．

［5］黃石鳳．2007－2008年宜章縣919例活動性肺結核病人痰檢檢測結果分析［J］．中國衛生檢驗雜志，2009，19(12):2914－2915．

［6］全國第五次結核病流行病學抽樣調查技術指導組/辦公室．2010年全國第五次結核病流行病學抽樣調查報告［J］．中國防癆雜志，2012，34(8):485－507．

作者：李源 高風華 單位：淄博市疾病預防控制中心