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摘要:目的評(píng)價(jià)某兒童型蛋白質(zhì)粉增強(qiáng)免疫力的作用。方法將受試樣品按0.825、1.650、3.300g/(kg•BW)3個(gè)劑量給予小鼠連續(xù)灌胃30d后進(jìn)行免疫試驗(yàn)。試驗(yàn)項(xiàng)目為細(xì)胞免疫功能試驗(yàn)、體液免疫功能試驗(yàn)、單核－巨噬細(xì)胞吞噬功能試驗(yàn)和NK細(xì)胞活性測(cè)定方法。結(jié)果1.650、3.300g/(kg•BW)兩個(gè)劑量組ConA誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞增殖能力較溶劑對(duì)照組明顯增強(qiáng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，3.300g/(kg•BW)劑量組單核－巨噬細(xì)胞碳廓清能力及小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞功能均明顯高于溶劑對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，1.650、3.300g/(kg•BW)兩個(gè)劑量組小鼠NK細(xì)胞活性(數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換值)明顯高于溶劑對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，1.650g/(kg•BW)劑量組小鼠抗體生成細(xì)胞數(shù)明顯高于溶劑對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論某兒童型蛋白質(zhì)粉具有增強(qiáng)免疫力作用。

關(guān)鍵詞:兒童型蛋白質(zhì)粉;免疫功能;小鼠

多數(shù)蛋白質(zhì)粉是以大豆分離蛋白質(zhì)為主材料，加上乳清蛋白等輔助蛋白一起加工而成的一類蛋白食品。該類食品不僅服用方便，而且脂肪含量低［1］。大豆分離蛋白的氨基酸構(gòu)成較為合理，含有大量人體必需氨基酸，為優(yōu)質(zhì)植物性蛋白質(zhì)。大豆分離蛋白還含有多種對(duì)人體生理機(jī)能有特殊作用的功能性成分，如大豆異黃酮、皂甙、膳食纖維等，能夠預(yù)防諸多“現(xiàn)代文明病”的發(fā)生［2－5］。乳清蛋白由于含有免疫球蛋白，能夠刺激人體免疫系統(tǒng)。乳鐵蛋白可以促進(jìn)鐵的吸收，是一種具有多種生物活性功能的鐵結(jié)合蛋白，還具有抗氧化、增強(qiáng)免疫調(diào)節(jié)等功能［6－8］。不同于動(dòng)物蛋白，大豆分離蛋白和乳清蛋白對(duì)動(dòng)物不會(huì)產(chǎn)生高血脂、高膽固醇等副作用。本兒童型蛋白質(zhì)粉將大豆分離蛋白質(zhì)、乳清蛋白和乳鐵蛋白組成混料，由于多種蛋白必須氨基酸互補(bǔ)作用，可以使其功能互補(bǔ)，增強(qiáng)其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。目前國(guó)內(nèi)未見(jiàn)兒童型蛋白質(zhì)粉增強(qiáng)免疫功能的相關(guān)報(bào)道。本次研究按照《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》(2003年版)的相關(guān)要求，探討了某兒童型蛋白質(zhì)粉增強(qiáng)免疫力的作用。

1材料與方法

1.1受試物某兒童型蛋白質(zhì)粉，淡黃色粉末，由國(guó)內(nèi)某公司提供。廠家推薦攝入量為10g/(人•d)，換算成單位體重推薦攝入量為0.33g/(kg•BW)(兒童體重按照30kg計(jì)算)。用蒸餾水配制成試驗(yàn)所需濃度。

1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康成年SPF級(jí)昆明小鼠200只，雌性，體重范圍18.5～22.0g。購(gòu)自湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為SCXK(湘)2016－0002。

1.3動(dòng)物飼養(yǎng)環(huán)境屏障環(huán)境，溫度為21～23℃，濕度為42%～66%。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)為SYXK(湘)2017－0001。輻照滅菌清潔級(jí)飼料，由北京科澳協(xié)力飼料有限公司提供。飼料生產(chǎn)許可證號(hào)為SCXK(京)2014－0010。

1.4主要儀器與試劑超凈工作臺(tái)、CO2培養(yǎng)箱、離心機(jī)、酶標(biāo)儀、723分光光度計(jì)、分析天平、SA緩沖液(美國(guó)Gibco公司)、Hank's液(美國(guó)Gibco公司)、RPMI1640培養(yǎng)基(美國(guó)Gibco公司)、小牛血清(HYCLONE公司)、刀豆蛋白A(美國(guó)Sigma公司)、噻唑藍(lán)(美國(guó)Sigma公司)。

1.5劑量選擇將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按體重隨機(jī)分為5個(gè)大組，用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ標(biāo)識(shí)，每組40只動(dòng)物。其中Ⅰ組動(dòng)物開(kāi)展NK細(xì)胞活性測(cè)定實(shí)驗(yàn)和ConA誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，Ⅱ組動(dòng)物完成臟/體比值計(jì)算、血清溶血素測(cè)定和抗體生成細(xì)胞檢測(cè)，Ⅲ組動(dòng)物開(kāi)展遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)實(shí)驗(yàn)，Ⅳ組動(dòng)物開(kāi)展碳廓清實(shí)驗(yàn)，Ⅴ組動(dòng)物開(kāi)展小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。每一大組動(dòng)物按體重隨機(jī)分為4組，每組10只動(dòng)物，分別為溶劑對(duì)照組以及低、中、高3個(gè)劑量組。實(shí)驗(yàn)設(shè)0.825、1.650、3.300g/(kg•BW)3個(gè)劑量組(分別相對(duì)于人體推薦量的2.5倍、5倍和10倍)。各劑量組用蒸餾水配制，按0.2ml/(10g•BW)每天灌胃一次，溶劑對(duì)照組給予等體積的蒸餾水。連續(xù)灌胃30d后對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的各項(xiàng)免疫指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。

1.6免疫指標(biāo)的測(cè)定臟器/體重比值計(jì)算，ConA誘導(dǎo)小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)(MTT法)，遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)實(shí)驗(yàn)(DTH法)，抗體生成細(xì)胞檢測(cè)實(shí)驗(yàn)(Jerne改良玻片法)，血清溶血素測(cè)定實(shí)驗(yàn)(血凝法)，小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，小鼠碳廓清實(shí)驗(yàn)，以及NK細(xì)胞活性測(cè)定實(shí)驗(yàn)，均按照規(guī)范方法進(jìn)行［9］。

1.7實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用SPSS15.0軟件包對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)(或轉(zhuǎn)換值)進(jìn)行方差分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)選擇α=0.05。

2結(jié)果

2.1蛋白質(zhì)粉對(duì)小鼠免疫器官胸腺和脾臟的臟器/體重比值影響低、中、高3個(gè)劑量組小鼠胸腺/體重和脾臟/體重值與溶劑對(duì)照組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)(見(jiàn)表1)。2.2蛋白質(zhì)粉對(duì)小鼠細(xì)胞免疫功能的影響中、高劑量組ConA誘導(dǎo)小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力明顯高于溶劑對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);低、中、高3個(gè)劑量組小鼠足跖腫脹度與溶劑對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)(見(jiàn)表2)。

2.3蛋白質(zhì)粉對(duì)小鼠體液免疫功能的影響中劑量組小鼠抗體生成細(xì)胞數(shù)明顯增多，與溶劑對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);低、中、高3個(gè)劑量組小鼠抗體積數(shù)與溶劑對(duì)照組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)(見(jiàn)表3)。

2.4蛋白質(zhì)粉對(duì)小鼠單核－巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響高劑量組單核－巨噬細(xì)胞碳廓清能力增強(qiáng)，并且巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的吞噬率和吞噬指數(shù)均升高，與溶劑對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)(見(jiàn)表4)。

2.5蛋白質(zhì)粉對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響中、高劑量組小鼠NK細(xì)胞活性(數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換值)明顯升高，與溶劑對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)(見(jiàn)表5)。

3討論

免疫是維持機(jī)體不患感染性疾病的穩(wěn)態(tài)狀態(tài)，是一系列復(fù)雜的生理學(xué)機(jī)制，使個(gè)體識(shí)別、區(qū)分外來(lái)物，并進(jìn)行中和或清除。機(jī)體的免疫系統(tǒng)可分為非特異性免疫系統(tǒng)和特異性免疫系統(tǒng)。非特異性免疫又稱為固有免疫，一般包括機(jī)體的組織屏障、固有免疫細(xì)胞和固有免疫分子3類，具有可遺傳、作用范圍廣等特點(diǎn)。特異性免疫又稱為獲得性免疫，包括細(xì)胞免疫和體液免疫，具有特異性和免疫記憶等特點(diǎn)。免疫功能的評(píng)價(jià)包括固有性免疫應(yīng)答和獲得性免疫應(yīng)答的評(píng)價(jià)，固有性免疫應(yīng)答評(píng)價(jià)包括單核－巨噬細(xì)胞吞噬功能測(cè)定和NK細(xì)胞活性的測(cè)定，獲得性免疫應(yīng)答的評(píng)價(jià)包括細(xì)胞免疫功能測(cè)定和體液免疫功能測(cè)定。單核－巨噬細(xì)胞的吞噬能力是衡量機(jī)體非特異性免疫功能的標(biāo)志之一，當(dāng)細(xì)菌、異物等抗原物質(zhì)進(jìn)入機(jī)體后可迅速被其吞噬和清除，因而巨噬細(xì)胞廓清指數(shù)的多少可以反映其吞噬功能的強(qiáng)弱［10－13］。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，兒童型蛋白質(zhì)粉可以明顯增強(qiáng)小鼠單核－巨噬細(xì)胞吞噬功能和NK細(xì)胞活性，對(duì)機(jī)體非特異性免疫有較強(qiáng)的促進(jìn)作用。獲得性免疫是機(jī)體對(duì)外界物質(zhì)刺激后形成的一種特異性反應(yīng)，比如胸腺是T細(xì)胞的主要生成場(chǎng)所，通過(guò)細(xì)胞免疫反應(yīng)來(lái)調(diào)節(jié)機(jī)體免疫平衡［14－20］。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果還顯示兒童型蛋白質(zhì)粉可以明顯增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能，對(duì)機(jī)體特異性免疫有較強(qiáng)的促進(jìn)作用。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:該兒童型蛋白質(zhì)粉可以增強(qiáng)小鼠的細(xì)胞免疫功能、單核－巨噬細(xì)胞的吞噬功能以及NK細(xì)胞活性，所以具有增強(qiáng)免疫力的功能。本次體液免疫功能評(píng)價(jià)中僅發(fā)現(xiàn)中劑量組溶血空斑數(shù)增加，低、高劑量組無(wú)影響，并且各劑量組抗體積數(shù)無(wú)明顯變化，故該產(chǎn)品不能增強(qiáng)小鼠的體液免疫功能。有報(bào)道顯示［21］，蛋白質(zhì)粉可以明顯增強(qiáng)小鼠體液免疫功能，與本次研究結(jié)果不完全一致，可能與兒童型蛋白質(zhì)粉配方具有一定的關(guān)系，有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

［1］盧文婷，王安.蛋白質(zhì)粉急性經(jīng)口毒性及致突變作用研究［J］.實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué)，2011，18(2):333－335.

［2］劉志勝，李里特，辰巳英三.大豆蛋白營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)和生理功能研究進(jìn)展［J］.中國(guó)食物與營(yíng)養(yǎng)，1999，19(4):21－23.

［3］臧學(xué)麗，劉娟.大豆分離蛋白改性技術(shù)的研究進(jìn)展［J］.吉林農(nóng)業(yè)，2018，30(1):62.

［4］尹秀蓮，趙瑜輝，管明，等.大豆分離蛋白提取及其凝膠制備影響因素研究［J］.食品與發(fā)酵科技，2017，45(6):62－66.

作者：胡雄飛 余曉巍 吳軍 胡楚元 熊志軍 單位：湖南省職業(yè)病防治院