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【摘要】本文研究了龍腦樟的組織培養(yǎng)新技術(shù)，選用龍腦樟嫩枝作為外植體，以MS為培養(yǎng)基篩選出適合龍腦樟各階段的適宜植物激素濃度和配比，分別為：外植體培養(yǎng)基MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L；增殖培養(yǎng)基MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L；生根培養(yǎng)基MS+IBA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。通過(guò)研究含有龍腦樟樹(shù)外植體在不同濃度和不同種類激素配比培養(yǎng)基的生長(zhǎng)情況，本文基本選出最適合龍腦樟樹(shù)組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

【關(guān)鍵詞】龍腦樟樹(shù)（CirmamonunCamphora）；組培；植物激素；培養(yǎng)

基龍腦樟樹(shù)（CirmamonunCamphora）既是名貴稀有的藥材，又是重要的化工原料，有植物黃金的美譽(yù)。它原產(chǎn)于印尼蘇門(mén)答臘島，天然龍腦香樹(shù)曾經(jīng)是龍腦的主要來(lái)源，但是由于長(zhǎng)期過(guò)渡采伐已近枯竭。龍腦樟是國(guó)內(nèi)專家一直以來(lái)都在尋找的植物資源。龍腦樟樹(shù)目前主要靠實(shí)生苗造林，單株個(gè)體得油率和含龍腦香精量差異大。如何在天然龍腦樟樹(shù)中選擇具有較高內(nèi)含物優(yōu)良單株，并將其擴(kuò)大繁育，獲得大量性狀優(yōu)良無(wú)性系苗木，組織培養(yǎng)無(wú)疑是最具有應(yīng)用潛力的快速繁殖技術(shù)。通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)，不僅可在短期內(nèi)提供整齊一致的良種苗木，又能為樹(shù)種改良和利用及遺傳轉(zhuǎn)化打下基礎(chǔ)，已在許多植物育苗生產(chǎn)中得到應(yīng)用。

1材料與方法

1.1研究地概況研究區(qū)位于廣東省廣州市銀排嶺113°22′18.99″E,23°11′52.89″N海拔39m,亞熱帶季風(fēng)氣候，年平均氣溫22℃，年平均降雨量為1623.6-1899.8mm,地貌屬低山丘陵,土壤屬紅壤。研究區(qū)屬銀排嶺林區(qū)，立地條件較好，龍腦樟種類優(yōu)良。

1.2試驗(yàn)材料試驗(yàn)材料選取從廣西取回種植在銀排嶺內(nèi)苗圃的龍腦樟樹(shù)，篩選優(yōu)良植株后剪取健壯的新生嫩枝。

1.3試驗(yàn)方法

1.3.1外植體誘導(dǎo)培養(yǎng)以MS為基本培養(yǎng)基，添加6-ba0.5，1.0，2.0mg/L，NAA0.2mg/L或IBA0.2mg/L，設(shè)置6種處理，每種處理接外植體為30個(gè)，重復(fù)3次。培養(yǎng)30d后觀察記錄，計(jì)算誘導(dǎo)率（誘導(dǎo)率=萌芽數(shù)/外植體數(shù)100%）。

1.3.2增殖培養(yǎng)根據(jù)試驗(yàn)外植體誘導(dǎo)培養(yǎng)結(jié)果，在初步確定適合龍腦樟增殖培養(yǎng)的激素種類以及激素濃度的基礎(chǔ)上，以MS為基本培養(yǎng)基，添加6-BA0.5，1.0，1.5mg/L，NAA0.05，0.1mg/L，GA30.5mg/L，設(shè)置6種處理，每個(gè)處理接種3瓶，每瓶7個(gè)芽，重復(fù)3次。培養(yǎng)基接種芽后放培養(yǎng)室，連續(xù)進(jìn)行3個(gè)培養(yǎng)周期以上的增殖培養(yǎng)，繼代培養(yǎng)30d為一個(gè)周期，培養(yǎng)周期末觀察記錄，計(jì)算增殖倍數(shù)（增殖倍數(shù)=增殖芽數(shù)/接種芽數(shù)）。

1.3.3生根培養(yǎng)以MS為基本培養(yǎng)基，添加IBA0.5，1.0，1.5mg/L，NAA0.05，0.1mg/L共6種處理，每個(gè)處理3瓶，每瓶7個(gè)芽苗，重復(fù)3次。將超過(guò)2cm的芽苗接種于培養(yǎng)基中，培養(yǎng)30d后觀察記錄，計(jì)算生根率。(生根率=生根數(shù)/芽苗數(shù)×100%)

1.3.4培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件所有培養(yǎng)基的蔗糖用量為30g/L，卡拉膠用量為6.5g/L，滅菌前培養(yǎng)基pH值調(diào)整為5.8。培養(yǎng)室溫度設(shè)定為26℃,光照強(qiáng)度約為1500LuX,光照時(shí)間為10h/d。

1.4數(shù)據(jù)處理方法采用Microsoftexcel2003對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。

2結(jié)果與分析

2.1外植體誘導(dǎo)培養(yǎng)龍腦樟外植體誘導(dǎo)培養(yǎng)養(yǎng)30d后觀察結(jié)果見(jiàn)表1和表2。從表1可以看出，添加NAA的培養(yǎng)基誘導(dǎo)率最高為40.04%，最低為36.21%，而添加IBA的培養(yǎng)基誘導(dǎo)率最高為37.50%，最低為31.25%，可見(jiàn)培養(yǎng)基添加NAA的誘導(dǎo)率明顯高于添加IBA的誘導(dǎo)率，因此確定NAA對(duì)龍腦樟的z嫩芽誘導(dǎo)有明顯促進(jìn)作用，其中6-BA濃度為0.5mgL、NA濃度0.2mg/L的培養(yǎng)基誘導(dǎo)率最高(40.04%)，初步確定適合龍腦樟外植體的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基。觀察發(fā)現(xiàn)所有萌芽葉片正常，葉色正常，生長(zhǎng)正常。

2.2增殖培養(yǎng)繼代培養(yǎng)30d后觀察結(jié)果見(jiàn)表3和表4。結(jié)果表明，NAA與6-BA配合使用對(duì)增殖培養(yǎng)有極顯著影響，不同濃度6-BA之間對(duì)增殖培養(yǎng)也有極顯著影響。從表3和表4可以看出，6-BA在不定芽增殖培養(yǎng)中起主要作用，NAA濃度為0.5mg/L對(duì)分化有較好的促進(jìn)作用。培養(yǎng)基中6-BA濃度為1.5mg/L、NAA濃度為0.5mg/L時(shí)，增殖倍數(shù)最大，增殖倍數(shù)達(dá)4.1倍，芽苗生長(zhǎng)正常，優(yōu)于其他5種處理，初步確此法適合龍腦樟不定芽的繼代增殖培養(yǎng)。

2.3生根培養(yǎng)芽苗誘導(dǎo)生根結(jié)果見(jiàn)表5和表6。結(jié)果表明，IBA在龍腦樟不定根誘導(dǎo)中作用明顯，在一定范圍內(nèi)隨著IBA濃度的增大，生根率也在增加;NAA對(duì)誘導(dǎo)不定根有較大的作用，且對(duì)根系的生長(zhǎng)有明顯影響，當(dāng)NAA0.1mg/L時(shí)根系生長(zhǎng)表現(xiàn)較好;培養(yǎng)基IBA濃度為0.5mg/L、NAA濃度為0.1mg/L時(shí)生根率最高(81.12%),根數(shù)也多,根系生長(zhǎng)正常，初步確定此法適合鐘龍腦樟苗不定根的誘導(dǎo)培養(yǎng)。

3結(jié)論與討論

本研究初步確定適合龍腦樟外植體芽誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖30g/L+卡拉膠6.5g/L，誘導(dǎo)率為40.04%;適合其繼代增殖培養(yǎng)的培養(yǎng)基為MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖30g/L+卡拉膠6.5g/L，增殖倍數(shù)為4.10;適合其不定根誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為MS+IBA0.5mg/L+NAAO.1mg/L+蔗糖30g/L+卡拉膠6.5g/L+活性碳0.5g/L，生根率為81.12%。目前，本研究的龍腦樟組培技術(shù)，還不是很完善，在后續(xù)試驗(yàn)中，仍需繼續(xù)努力研究培養(yǎng)基配方。

參考文獻(xiàn)

[1]戴小英,章挺等.龍腦樟組培繁殖及植株再生技術(shù)研究[J].林業(yè)科技通訊,2016(8):6-9.

[2]馮瑜.龍腦樟組織培養(yǎng)再生體系研究[D].福州:福建農(nóng)林大學(xué),2015.15-21.

[3]徐劍.龍腦樟細(xì)胞懸浮培養(yǎng)體系的建立及優(yōu)化[D].福州:福建農(nóng)林大學(xué),2015.11-20.

[4]蔡玲,吳幼媚等.樟腦型樟樹(shù)組培單芽生根及移栽技術(shù)[J].林業(yè)科技開(kāi)發(fā),2014(4):96-98.

[5]蔡玲,覃子海等.樟腦型樟樹(shù)芽器官離體培養(yǎng)技術(shù)[J].廣西林業(yè)科學(xué),2013(4):315-318.

作者：唐湛；吳剛；米秀寶；蘇燕蘭 單位：廣東生態(tài)工程職業(yè)學(xué)院