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《畜牧與獸醫(yī)雜志》2014年第九期
1原精液質(zhì)量的控制
1.1提高原精液的品質(zhì)原精液品質(zhì)包括采精量、精子活力、精子密度、精子畸形率等。在生產(chǎn)過程中,應(yīng)科學(xué)飼養(yǎng)認(rèn)真選留優(yōu)秀種公豬,并根據(jù)公豬精液檢驗(yàn)結(jié)果,選留精液量大、精子密度高、精子活力強(qiáng)的公豬,及時淘汰30月齡以上各項(xiàng)生理機(jī)能開始退化,精液質(zhì)量下降的公豬,可以有效提高原精液的質(zhì)量。需要特別注意夏季熱應(yīng)激對種公豬原精液的影響,應(yīng)及時調(diào)整日糧配方,添加維生素C、維生素E或清熱消暑中草藥等緩解種豬的熱應(yīng)激;采用濕簾降溫或修建恒溫豬舍;供給種豬充足的清潔涼水或井水;調(diào)整飼喂、運(yùn)動時間;采精室安裝空調(diào)等措施可以明顯提高夏季種公豬精液的品質(zhì)。另外在種公豬的防疫、治療上應(yīng)避免對精液品質(zhì)造成影響,疫苗注射應(yīng)分批、合理安排注射時間;一些藥物如磺胺類藥、伊維菌素等對精液品質(zhì)都有影響,應(yīng)盡量避免使用,盡量采用中草藥來代替。
1.2注意采精環(huán)節(jié)的管理在實(shí)際生產(chǎn)過程中采精環(huán)節(jié)處理不當(dāng),將對原精液的質(zhì)量造成嚴(yán)重的影響,很多種公豬站都存在一些問題,應(yīng)該注意以下幾點(diǎn):①采精室應(yīng)干凈、無塵、地面平整,便于沖洗和消毒,并鋪設(shè)防滑墊,安裝空調(diào)控制室內(nèi)溫度。②采精室應(yīng)安裝紫外線燈。③公豬采精前應(yīng)清潔體表,腹部和包皮必須進(jìn)行清洗、消毒,最后擦干。④手握法采精過程中應(yīng)一只手帶雙層消毒手套,按摩公豬包皮后要脫去外層手套再緊握龜頭采精。⑤公豬最初射出的少量精液約(5mL)要棄之不用。⑥集精杯在開采前要預(yù)熱到37℃,杯口用過濾紙或四層消毒紗布進(jìn)行精液過濾。⑦采精人員要樹立無菌概念,采精前更衣?lián)Q鞋,一切與精液接觸的物品要嚴(yán)格消毒并與精液等溫,盡量減少人為因素對原精液品質(zhì)造成的影響。
2精液處理過程中的質(zhì)量控制
2.1注重實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生和環(huán)境實(shí)驗(yàn)室要專人負(fù)責(zé),保持地面、操作臺面、儀器設(shè)備的清潔,設(shè)置更衣輔助區(qū),進(jìn)出必須更衣?lián)Q鞋;實(shí)驗(yàn)室要安裝空調(diào)控制室內(nèi)溫度在18℃~25℃,并安裝紫外線燈消毒,安裝窗簾防太陽光直射;精液傳遞窗口在精液傳遞后應(yīng)及時關(guān)閉,有條件的應(yīng)設(shè)置雙層推拉門;根據(jù)生產(chǎn)實(shí)際需要將儀器設(shè)備依次擺放在精液檢查、稀釋、分裝和洗滌區(qū),以減少實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生和環(huán)境對精液品質(zhì)造成的影響。
2.2加強(qiáng)精液品質(zhì)的鑒定種公豬精液采集后要及時進(jìn)行精液品質(zhì)的檢查、稀釋和分裝。精液品質(zhì)的檢查,主要包括外觀氣味、采精量、精子活力、精子密度、精子畸形率和細(xì)菌菌落數(shù)的檢查。生產(chǎn)中要嚴(yán)格進(jìn)行每一項(xiàng)的檢查,任何一項(xiàng)不合格則判定為不合格,應(yīng)棄之不用。
2.2.1外觀、氣味的判定用目測和鼻嗅的方法,正常的種公豬精液成均勻一致的乳白色并略帶腥味。如果精液呈黃色、紅色、帶有膿性物、有異物或帶有腥臭味都應(yīng)廢棄。
2.2.2采精量的判定由于豬的精液量大,采用有刻度的量杯或量筒測量會產(chǎn)生較大的誤差。實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)用稱量法計(jì)算采精量相對比較準(zhǔn)確,將豬的精液的比重按照1g/cm3計(jì)算,則1g精液相當(dāng)于1mL,采精量低于100mL時棄之不用。要求電子秤的精確度越高越好,每次使用電子秤時都應(yīng)調(diào)整歸零,以保證稱量的準(zhǔn)確性。
2.2.3精子活力的判定取中層精液在200~400倍的顯微鏡下觀察3個視野,每份精液應(yīng)做2次檢查,取平均值,精子活力低于70%的棄之不用。檢查時顯微鏡載物臺的載玻片和蓋玻片要預(yù)熱至37℃,以減少溫度對精子活力判定的影響。與精液接觸的移液器槍頭使用前要用75%酒精棉球消毒晾干。
2.2.4精子密度的判定采用精子密度儀或可見光分光光度計(jì)法測定,密度低于1億/mL的棄之不用。在測定中應(yīng)取精液中層進(jìn)行檢查,儀器應(yīng)定期用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板法進(jìn)行校正,以保證精子密度判定的準(zhǔn)確性。
2.2.5精子畸形率的判定一般采用姬姆薩染色法進(jìn)行染色,在400~600倍顯微鏡下觀察每個抹片中精子不少于200個,并記錄畸形精子數(shù),記算精子畸形率,取兩個抹片的平均值,超過20%的棄之不用。精子畸形率的檢查每2個月抽檢一次。在環(huán)境溫度變化巨大、疾病治療后或防疫后要加強(qiáng)檢查,才能保證精液的品質(zhì)。
2.2.6細(xì)菌菌落數(shù)的判定精液中微生物的含量對精液的品質(zhì)、保存及受胎效果有重要的影響,雖然《種豬常溫精液》中沒有對其進(jìn)行規(guī)定,但在實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)該按照《豬常溫精液生產(chǎn)與保存技術(shù)規(guī)范》的要求進(jìn)行檢查。因此對精液細(xì)菌菌落數(shù)的檢查非常必要,一般采用營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),48h后觀察培養(yǎng)平皿中的菌落數(shù),超過1×103/mL時棄之不用。菌落數(shù)的檢查每2個月抽檢一次。通過定期測定精液中的細(xì)菌菌落,可以掌握種公豬的健康狀況及采精過程中的每個環(huán)節(jié)的操作,只有減少細(xì)菌對精液的污染,才能有效地提高精液品質(zhì)。
2.3做好精液的稀釋和分裝
2.3.1稀釋液的配制豬精液稀釋液的配制一般種公豬站都使用商品稀釋劑,但在實(shí)際生產(chǎn)中往往出現(xiàn)很多問題,如不用雙重蒸餾水、稱量不準(zhǔn)確、隔天還用等。稀釋液的配制應(yīng)嚴(yán)格按照以下要求進(jìn)行:①所用器皿干燥箱加熱至160℃后恒溫1h,自然冷卻后待用。②要用新鮮的雙重蒸餾水。③現(xiàn)用現(xiàn)配,一般使用前1h配置,配制后標(biāo)明配置日期和時間。④稀釋粉使用后應(yīng)立即密封,以免灰塵、雜菌等污染,防止分解和潮解。⑤稀釋粉和雙重蒸餾水稱量必須精確。⑥剩余稀釋液密封后置于冰箱中冷藏時間不超過24h。
2.3.2精液的稀釋操作首先要準(zhǔn)確計(jì)算應(yīng)添加稀釋液的量。應(yīng)添加稀釋液量=采精量×精子密度×每份劑量/41.7-采精量。(41.7的解釋:《種豬常溫精液》要求精子活力≥60%,每劑量中直線前精子數(shù)≥25億,則每劑量總精子數(shù)≥41.7億)同時要嚴(yán)格進(jìn)行以下操作:①精液采集后應(yīng)盡快稀釋,放置時間不宜超過15min。②稀釋液要先在35℃~37℃水浴鍋中預(yù)熱,根據(jù)精液溫度調(diào)節(jié),采用等溫稀釋,不得反向操作。③稀釋時將稀釋液沿杯壁緩慢加入到精液中,輕輕搖動或一個方向攪拌,混合均勻,防止機(jī)械性損傷精子。高倍稀釋時,先低倍稀釋(1∶1)~(1∶2),30s后再加入余下的稀釋液。④精液稀釋后應(yīng)靜置5min再做精子活力檢查,活力不低于60%進(jìn)行分裝。
2.3.3精液的分裝應(yīng)選用對精子無毒害作用且滅菌的一次性塑料袋或瓶;每份80~100mL,分裝后應(yīng)密封;精液包裝應(yīng)標(biāo)明產(chǎn)品名稱、劑量、生產(chǎn)單位、生產(chǎn)日期、批號、品種或類型、耳號、有效期和貯存溫度。
3精液產(chǎn)品保存過程中的質(zhì)量控制
豬精子對低溫很敏感,因此保存溫度至關(guān)重要[3]。精液分裝后置于室溫22℃~25℃下1~2h緩慢降溫后,平放入17℃恒溫箱內(nèi)避光保存;也可用紗布(或干毛巾)包裹后直接放在17℃恒溫箱內(nèi);稀釋后的精液應(yīng)能保存72h以上,在保存中每天搖動,防止精子因?yàn)槌恋矶劳?對于儲存的常溫精液產(chǎn)品應(yīng)盡快用完,超過保質(zhì)期的精液不應(yīng)使用。
4及時進(jìn)行精液產(chǎn)品的質(zhì)量檢驗(yàn)
豬常溫精液產(chǎn)品的質(zhì)量檢驗(yàn)分為常規(guī)檢驗(yàn)和型式檢驗(yàn)。常規(guī)檢驗(yàn)是型式檢驗(yàn)的一部分,即單項(xiàng)目檢驗(yàn),主要檢驗(yàn)項(xiàng)目是外觀和精子活力,在生產(chǎn)批入庫前和銷售前的檢驗(yàn)。型式檢驗(yàn)是評定產(chǎn)品質(zhì)量是否符合標(biāo)準(zhǔn)的檢驗(yàn),即全部項(xiàng)目檢驗(yàn),為保證精液產(chǎn)品質(zhì)量每兩周為一抽檢周期。無論常規(guī)檢驗(yàn)還是型式檢驗(yàn),任何一項(xiàng)檢驗(yàn)未達(dá)標(biāo),都判定為不合格。在實(shí)際生產(chǎn)中,銷售前要由質(zhì)檢人員對精子活力再進(jìn)行一次檢驗(yàn),活力低于60%的不能出售。除此之外,應(yīng)每2周對精液產(chǎn)品的六項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)進(jìn)行隨機(jī)抽檢。由于豬常溫精液產(chǎn)品保存時間短、每頭豬每天產(chǎn)量少,因此生產(chǎn)廠家只有及時進(jìn)行產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn),發(fā)現(xiàn)問題及時查找原因解決,才能保證生產(chǎn)出優(yōu)質(zhì)的精液產(chǎn)品。總之,豬常溫精液產(chǎn)品從生產(chǎn)到出售涉及許多環(huán)節(jié),為生產(chǎn)出優(yōu)質(zhì)的精液產(chǎn)品,必須加強(qiáng)種公豬的飼養(yǎng)管理、實(shí)驗(yàn)室管理和質(zhì)量檢測等各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制,才能充分發(fā)揮種公豬的種用價(jià)值,保證豬品種改良工作的順利進(jìn)行。
作者:倪俊娟單位:河南省許昌市畜牧技術(shù)推廣站